凝胶柱色谱也称为凝胶过滤色谱、分子筛色谱、凝胶渗透色谱(GPC)、排阻色谱。它主要是利用凝胶网状结构的分子筛作用,根据被分离物分子大小不同进行分离。具有的优点有分离条件温和,适用于不稳定的分子; 样品回收率高,几乎可达100%; 重复性高; 操作的时间相对较短,所需要的设备简单、经济。 [1]
凝胶柱色谱的支持物是多孔凝胶,当不同分子流经凝胶色谱柱时,每个分子不仅是向下移动,而且还在做无定向的扩散运动。分子直径比凝胶孔径大的蛋白质分子,不能进入凝胶颗粒的微孔,只能通过凝胶颗粒之间的空隙,这样的分子是随溶剂一起移动而分子直径比凝胶孔径小的蛋白质分子,能够自由进人凝胶颗的,故此 先流出柱外。
近年来,凝胶色谱也广泛用于分离小分子化合物。化学结构不同但相对分子质量相近的物质,不可能通过凝胶色谱法达到完全的分离纯化的目的
凝胶色谱法原理
在凝胶色谱中会有三种情况,一是分子很小,能进入分子筛全部的内孔隙;二是分子很大,完全不能进入凝胶的任何内孔隙;三是分子大小适中,能进入凝胶的内孔隙中孔径大小相应的部分。
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